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标准品的稀释原则: 2 瓶,每瓶临用前以样品稀释液稀释至 1ml ,盖好后静置 10 分钟以上,然后反复颠倒 / 搓动以助溶解,其浓度为 300 pg/ml ,做系列倍比稀释后,分别稀释 300 pg/ml , 150 pg/ml , 75 pg/ml , 37.5 pg/ml , 18.5 pg/ml , 9 pg/ml , 4.5 pg/ml ,样品稀释液直接作为标准浓度 0 pg/ml ,临用前 15 分钟内配制。 如配制 150 pg/ml 标准品:取 0.5ml (不要少于 0.5ml ) 300 pg/ml 的上述标准品加入含 0.5ml 样品稀释液的 Eppendorf 管中,混匀即可,其余浓度以此类推。 生物素标记抗体的稀释原则: 临用前以生物素标记抗体稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔 100 μ l ),实际配制时应多配制 0.1-0.2ml 。如 10 μ l 生物素标记抗体加 990 μ l 生物素标记抗体稀释液的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。 辣根过氧化物酶标记亲和素的稀释原则: 临用前以辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液稀释,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(每孔 100 μ l ),实际配制时应多配制 0.1-0.2ml 。如 10 μ l 辣根过氧化物酶标记亲和素加 990 μ l 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 的比例配制,轻轻混匀,在使用前一小时内配制。
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●ELISA试剂盒可以测量多少标本?●: ELISA试剂盒采用双抗夹心法测 定标本中的含量活性,ELISA试剂盒主要分为96T、48T两种规格,96t标准的可 以检测85个样本,10个标准品孔,1个空白对照。48t标准的可以检测37个样本 ,10个标准品孔,1个空白对照。试剂盒的主要组成由:酶标板、标准品、稀释 液、显色液、终止液、洗涤液、封板膜、说明书等。ELISA方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。但ELISA测定中影响因素较多,而且其操作中有一定的技术要求,在检测过程中除正常反应外,有时常见到一些错误的结果。引起ELISA测定错误结果的原因主要有: ①标本因素;②试剂因素; ③操作因素。
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编辑:小檀20181010
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