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当前位置:首页产品中心自产ELISA试剂盒8-羟基脱氧鸟苷ELISA试剂盒

8-羟基脱氧鸟苷ELISA试剂盒
产品简介:

8-羟基脱氧鸟苷ELISA试剂盒用于定量检测血清、血浆、尿液等样本中DNA氧化损伤标志物8-OHdG含量。采用竞争法,检测范围0.47-30 ng/mL或0.5-200 ng/mL,灵敏度可达0.2 ng/mL。规格48T/96T,2-8℃保存,有效期6-12个月。仅限科研使用。

产品型号:

更新时间:2026-03-24

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产品介绍

8-羟基脱氧鸟苷ELISA试剂盒

8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)是DNA氧化损伤的特异性标志物,主要由活性氧自由基(ROS)攻击DNA中的鸟piao呤碱基形成,广泛存在于人体体液及组织中。其含量变化与氧化应激相关疾病密切相关,包括肿瘤、心血管疾病、神经退行性疾病、糖尿病及衰老等,在氧化应激机制研究、疾病早期诊断、病情监测及药物抗氧化活性筛选等领域具有重要的科研价值。本8-羟基脱氧鸟苷ELISA试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附技术(ELISA),专为体外定量检测人、小鼠、大鼠等物种样本中8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)的含量而设计,可广泛应用于基础医学研究、临床科研、药物研发及生物样本检测等领域,为8-OHdG相关的氧化应激机制研究和相关疾病的研发提供可靠、精准的实验数据支撑。本试剂盒仅供体外研究使用,不得用于医学诊断用途。

检测原理

本试剂盒基于双抗体夹心ELISA技术原理,核心反应过程如下:首先将抗8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)特异性抗体预先包被于酶标板微孔内,形成固相抗体;向微孔中加入标准品或待测样本,样本中的8-OHdG会与固相包被抗体特异性结合,温育后洗涤去除未结合的杂质;随后加入标记的抗8-OHdG检测抗体,该抗体与样本中已结合的8-OHdG特异性结合,形成“固相抗体-8-OHdG-标记检测抗体"的复合物;接着加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的链霉亲和素,链霉亲和素与特异性结合,进一步放大免疫反应信号;再次洗涤去除游离成分后,加入显色底物TMB,TMB在HRP的催化作用下呈现蓝色,加入终止液后,蓝色会转化为黄色;最后使用酶标仪在450nm波长处测定各孔的吸光度(OD值),样本中8-OHdG的浓度与OD值呈正比,通过绘制标准曲线即可计算出待测样本中8-OHdG的具体浓度。

产品特点

  • 特异性强:采用高特异性单克隆抗体,可精准识别8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG),与脱氧鸟苷(dG)、其他氧化损伤核苷及相关代谢产物无明显交叉反应,有效避免检测干扰,确保检测结果的准确性和特异性,符合ELISA试剂盒的严格质控标准。

  • 灵敏度高:检测下限低(可达0.1ng/mL-1pg/mL),可精准检测出低浓度样本中的8-OHdG,满足微量样本检测需求,适用于正常生理状态、疾病早期等低含量8-OHdG的相关研究,可捕捉样本中8-OHdG的微小浓度变化,精准反映DNA氧化损伤程度。

  • 重复性好:板内变异系数小于10%、板间变异系数小于12%,批间差异小,经过严格三轮质检,最da限度保证试剂盒的批内、批间一致性,实验结果稳定可靠,可有效减少实验误差,保障实验数据的重复性和可比性。

  • 操作便捷:试剂盒组分齐全、预包被酶标板,无需额外包被处理,实验步骤清晰易懂,全程可在3.5-4.5小时内完成,手操作时间短,适合批量样本检测,显著提高实验效率,降低实验操作难度。

  • 适用范围广:可兼容多种生物样本类型,检测范围宽(通常为0.1ng/mL-100ng/mL或1pg/mL-1000pg/mL),可根据样本浓度灵活调整稀释倍数,适配不同科研场景需求,且样本稀释后检测值可保持在预期浓度的80%-120%,线性良好。

  • 稳定性佳:各试剂组分经过严格质检和稳定性测验,储存条件明确,未拆封状态下保质期长,试剂活性稳定,可有效保障实验的重复性和可靠性,能避免长途运输和保存过程中抗原抗体的失活,确保检测结果稳定。

适用样本类型

本试剂盒适用于检测多种生物样本中的8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG),包括但不限于:人、小鼠、大鼠等物种的血清、血浆、尿液、唾液、细胞培养上清液、组织匀浆、细胞裂解液及其他相关生物体液。
备注:(具体样本处理方法请参考产品说明书),简要处理原则如下:血清样本需室温自然凝固后,1000×g离心10分钟取上清,操作过程中避免剧烈震荡;血浆样本可使用EDTA、柠檬酸盐、肝素作为抗凝剂,采集后1000×g离心30分钟去除颗粒取上清,避免溶血;尿液样本需4℃离心去除沉淀后取上清,可根据浓度适当稀释;组织匀浆需用预冷PBS按比例研磨、1000×g离心10分钟取上清,研磨过程中保持低温;细胞相关样本需经消化、洗涤、破碎、离心后取上清,具体操作细节及注意事项以产品说明书为准,若样本中存在大量杂质,检测前需先离心或过滤处理。

储存与注意事项

(一)储存条件

  • 未拆封试剂盒:2-8℃避光保存,可稳定保存6个月;若长期不使用(超过3个月),请拆开试剂盒,将预包被酶标板、标准品、浓缩标记抗体、浓缩HRP标记链霉亲和素等组分于-20℃避光保存,可保存至有效期(通常为6个月),避免反复冻融,运输时需采用湿冰条件,防止试剂失活。

  • 已拆封试剂:预包被酶标板剩余条带需密封后-20℃保存,加入干燥剂防止受潮和污染;浓缩洗涤液、标准品/等液体试剂2-8℃保存,开封后尽快使用完毕(建议1个月内);浓缩HRP标记链霉亲和素、底物溶液(TMB)需避光保存,所有试剂瓶盖需旋紧,防止蒸发和微生物污染,底物显色液若已变蓝则不可使用。

  • 样本储存:采集后的样本若1周内检测,可4℃保存;若长期保存,需按单次使用量分装,-20℃保存(1个月内)或-70℃/-80℃保存(3个月内),避免反复冻融,冻融后的样本需轻轻混匀后再检测,不要在37℃或更高温度加热解冻,防止样本中8-OHdG降解。

(二)注意事项

  • 实验前准备:所有试剂和样本需提前从冰箱取出,室温回温20-25℃,避免温度差异影响实验结果;酶标仪需提前15分钟预热,确保检测精度;浓缩洗涤液若出现结晶,可40℃水浴微加热溶解后再稀释使用,当日配制当日使用,20×洗涤缓冲液需按1:20比例用蒸馏水稀释后使用。

  • 操作规范:严格按照产品说明书的实验步骤、试剂用量和温育时间操作,不得随意更改;加样时需使用高精度移液器,勤换吸头,避免交叉污染;温育过程中需用封板膜密封酶标板,确保反应充分,防止液体蒸发和污染,温育时避免强光直接照射,不要让微孔干燥;洗涤步骤需彻di,在加入底物前确保尽量吸干孔内液体,可重复洗板5次,避免未结合成分残留影响检测结果;消除板底残留的液体和手指印,否则会影响OD值检测准确性。

  • 试剂使用:标准品需离心后再溶解,梯度稀释时需准确操作,每次实验需重新配制标准品工作液,标准品浓度可参考0.1、0.2、0.5、1、2、5ng/mL或对应pg/mL梯度;稀释后的试剂不可重复使用,溶解含蛋白质的溶液时避免起泡,防止蛋白变性;不同批次、不同厂家的试剂组分不可混用,以免导致结果异常;任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体,以免破坏试剂生物活性;不能使用过期产品。

  • 安全防护:实验过程中需穿戴实验服、口罩和乳胶手套,严格遵守生物实验室安全防护规定,尤其是处理血液、尿液等样本时;终止液具有腐蚀性,操作时需做好防护,避免接触皮肤和眼睛,若不慎接触,需用大量清水冲洗;如果可能传播疾病,所有的样品都应规范管理,按照规定的程序处理样品和检测装置。

  • 其他:若待测样本浓度高于标准品zui高值,需适当稀释后再检测,建议先做预实验确定稀释倍数,经过大量正常标本检验,多数标本正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内,可直接取50μL样本上样;若样本不在说明书所列范围,建议做预实验验证检测有效性;实验结束后,废弃试剂和样本需按生物安全规定妥善处理;酶标板微孔底若有气泡,需轻轻敲击去除,避免影响吸光度检测,检测需在加入终止液后15分钟内完成,防止显色反应过度。

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