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肺表面活性物质相关蛋白DELISA试剂盒
产品简介:

肺表面活性物质相关蛋白DELISA试剂盒用于定量检测血清、血浆或组织匀浆等样本中SP-D浓度。该产品采用双抗体夹心法,具有高灵敏度与特异性,操作简便,是肺损伤及呼吸系统疾病研究的可靠工具。

产品型号:

更新时间:2026-03-20

厂商性质:生产厂家

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产品介绍

肺表面活性物质相关蛋白DELISA试剂盒

肺表面活性物质相关蛋白DELISA试剂盒,是基于酶联免疫吸附试验(ELISA)原理研发的科研专用检测试剂盒,可特异性检测样本中肺表面活性物质相关蛋白D的含量,为肺部疾病、肺损伤修复、炎症反应及相关疾病机制研究提供精准的定量检测工具。该试剂盒采用双抗体夹心法,特异性强、灵敏度高,检测范围宽,操作简便快速,无需复杂实验设备,适配常规实验室检测需求,可广泛应用于血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆等多种样本类型的检测。本试剂盒科研用途,严禁用于临床诊断、诊疗及其他非科研场景。

检测原理

该试剂盒的核心检测原理是基于抗原-抗体特异性结合与酶催化显色反应的协同作用,采用双抗体夹心法实现对目标蛋白的精准定量检测,具体原理如下:
1.  固相包被:将目标蛋白特异性捕获抗体包被于聚苯乙烯微孔板表面,使其固定化并保持免疫学活性,形成固相抗体,为特异性结合奠定基础,减少非特异性干扰;
2.  样本孵育:向包被好的微孔中加入待检测样本及标准品,样本中存在的目标蛋白会与固相抗体发生特异性结合,形成“固相抗体-目标蛋白"复合物,孵育过程中严格控制温度与时间,确保结合反应充分进行;
3.  酶标结合:加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体,该抗体可特异性识别目标蛋白的另一表位,与“固相抗体-目标蛋白"复合物结合,形成“固相抗体-目标蛋白-酶标检测抗体"的夹心复合物,使HRP固定在固相载体上,双重特异性结合进一步提升检测准确性;
4.  洗涤除杂:通过多次洗涤步骤,去除微孔板中未结合的酶标抗体、样本杂质及其他非特异性结合物,降低背景信号,确保检测结果的准确性和可靠性;
5.  显色反应:加入HRP专用底物(邻苯二胺,OPD),在HRP的催化作用下,底物发生显色反应,生成橙色可溶性产物,产物颜色深浅与样本中目标蛋白的含量呈正相关,显色强度直接反映目标蛋白浓度;
6.  终止与检测:加入终止液(3M H₂SO₄)终止显色反应,溶液颜色由橙色变为黄色,使用酶标仪在492nm波长处测定各孔吸光度(OD值),根据标准品绘制的标准曲线,即可推算出待检测样本中目标蛋白的具体含量,检测灵敏度可达pg/ml级别,满足微量蛋白检测需求。

产品特点

  • 特异性强:采用高特异性的双抗体夹心设计,捕获抗体与检测抗体均针对目标蛋白的不同表位,可特异性识别目标蛋白,有效避免样本中其他蛋白、杂质及同源蛋白的交叉反应,检测特异性高,结果准确可靠,适配复杂样本检测需求;

  • 灵敏度高:优化抗体浓度与孵育条件,检测灵敏度可达pg/ml级别,可精准检测样本中微量的目标蛋白,能够捕捉到样本中目标蛋白的细微浓度变化,满足低表达样本的检测需求,适配肺部炎症、肺损伤修复等相关实验研究;

  • 操作简便:试剂盒包含检测所需全部试剂,无需额外配制复杂试剂,实验步骤清晰,全程可在酶标板上完成,孵育时间优化设计,无需特殊实验技能,经简单培训即可上手操作,适配常规实验室及科研新手使用,大幅节省实验时间与人力成本;

  • 检测范围宽:标准品浓度梯度合理,检测范围覆盖pg/ml至ng/ml级别,可适配不同浓度范围的样本检测,无需对样本进行过度稀释,减少稀释过程带来的误差,同时可避免因样本浓度过高或过低导致的检测结果偏差,提升实验重复性;

  • 兼容性好:可适配血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆等多种常见科研样本类型,无需复杂样本预处理,同时兼容常规酶标仪,无需额外配备专用检测设备,适配多类型科研实验设计,可与细胞实验、分子生物学实验协同使用;

  • 稳定性高:试剂盒试剂经严格质量控制,批内与批间变异系数低,试剂稳定性好,冷藏储存条件下可稳定保存,避免因试剂不稳定导致的检测结果波动,保障实验数据的重复性和可靠性,适合长期科研实验使用。

适用样本类型

本试剂盒可广泛适配多种常见科研样本类型,具体包括:血清、血浆、细胞培养上清液、组织匀浆、细胞裂解液,备注:(具体样本处理方法请参考产品说明书)。
各类样本可直接用于检测(无需复杂预处理),其中血清、血浆样本需离心去除杂质(3000rpm,10分钟),组织匀浆、细胞裂解液需离心去除沉淀后取上清液,确保样本纯净,避免杂质影响检测结果。

储存与注意事项

(一)储存条件

  • 试剂盒未开封时:置于2-8℃冷藏储存,避免冷冻、高温(超过30℃)及强光直射,严禁反复冻融,确保试剂活性,未开封试剂盒保质期为12个月;

  • 试剂盒开封后:包被抗体微孔板密封后2-8℃冷藏保存,避免受潮、污染,建议1个月内使用完毕;酶标检测抗体、底物液、终止液等试剂,密封后2-8℃冷藏,开封后建议2周内使用完毕;

  • 标准品:冻存于-20℃以下,避免反复冻融,溶解后可在2-8℃冷藏保存3-5天,长期保存需分装后冻存;

  • 洗涤液(浓缩型):2-8℃冷藏保存,开封后密封,避免污染,稀释后使用,稀释后的洗涤液可在4℃保存1周;

  • 运输条件:采用冰袋低温运输(2-8℃),运输过程中做好防震、防破损措施,运输时间不超过48小时,接收后立即转入2-8℃冷藏储存。

(二)注意事项

  • 本试剂盒用于科研,严禁用于临床诊断、诊疗及其他非科研用途,实验过程中需严格遵循无菌操作规范,避免试剂污染、样本交叉污染,同时遵循科研实验伦理要求,规范处理废弃试剂、样本及实验耗材;

  • 实验前需仔细阅读本说明书,严格按照操作步骤、孵育时间、温度及试剂用量进行操作,避免因操作不当导致检测结果偏差,尤其注意孵育温度的控制(严禁低于35℃或高于39℃),适配试剂反应特性;

  • 所有试剂使用前需恢复至室温并轻轻摇匀,避免剧烈震荡,酶标检测抗体、底物液等试剂避免反复冻融,防止试剂活性下降;浓缩洗涤液需按比例(1:20)用蒸馏水稀释后使用,未稀释的浓缩液不可直接加入微孔板;

  • 样本处理:血清、血浆样本避免溶血、浑浊,溶血样本禁止使用;组织匀浆、细胞裂解液需离心去除沉淀,取上清液用于检测,避免杂质干扰检测结果;样本稀释需使用试剂盒配套试剂,确保稀释比例准确;

  • 加样操作:移液器需校准,加样时避免气泡产生,加样量精准控制,不同样本、试剂需使用专用移液器吸头,避免交叉污染;加样后需轻轻震荡微孔板,使液体充分混匀,确保反应充分;

  • 洗涤操作:洗涤次数、洗涤液用量需严格遵循说明书要求,避免洗涤不充分(导致背景信号过高)或过度洗涤(导致抗原-抗体复合物脱落,检测结果偏低);zui后一次洗涤后需拍干残留液体,避免残留洗涤液稀释底物液;

  • 显色反应:底物液需避光保存,显色过程需避光孵育,避免强光照射导致显色异常;显色时间可根据实际显色情况适当调整,但不可超过25分钟,防止显色过度影响检测结果;

  • 终止与检测:终止液加入后需立即测定OD值,避免放置时间过长导致溶液颜色褪色,影响检测准确性;酶标仪需提前校准,波长设置为492nm,空白孔用于调零;

  • 实验所用器材(移液器、离心管、微孔板等)需清洁、无菌,避免污染;实验结束后,废弃试剂、样本及实验耗材需经灭菌处理后丢弃,避免生物污染,符合科研实验安全规范;

  • 若检测结果异常(如标准曲线线性差、样本OD值超出检测范围),可排查试剂活性、样本处理、操作步骤等因素,针对性优化实验条件,必要时重复实验,确保实验数据可靠。

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以上信息仅供参考,具体请已产品说明书为准。

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