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多功能蛋白聚糖ELISA试剂盒
产品简介:

多功能蛋白聚糖ELISA试剂盒用于定量检测VCAN浓度。VCAN是细胞外基质蛋白聚糖,参与细胞黏附、增殖和迁移,与肿瘤、炎症等疾病相关。采用双抗夹心ELISA法,适用于血清、组织等样本,仅供科研使用。

产品型号:

更新时间:2026-03-09

厂商性质:生产厂家

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产品介绍

多功能蛋白聚糖ELISA试剂盒

多功能蛋白聚糖ELISA试剂盒(Multifunctional Proteoglycan ELISA Kit),是基于酶联免疫吸附法(ELISA)原理研发的科研专用检测试剂盒,可特异性检测相关样本中多功能蛋白聚糖(核心糖蛋白)、其降解产物及相关信号通路分子的含量,也可用于相关样本中该蛋白的表达水平监测、功能研究及药物干预效果评估,经特异性验证、灵敏度测试及重复性实验确认,无交叉反应,检测结果准确可靠,无试剂降解、杂菌污染等问题。多功能蛋白聚糖是一类重要的大分子糖蛋白,广泛存在于细胞表面和细胞外基质中,核心功能是参与细胞粘附、信号转导、细胞分化与迁移,同时参与细胞外基质形成、组织修复及炎症反应调节,其表达异常与组织损伤、肿瘤侵袭、骨组织矿化异常等多种病理过程相关,广泛应用于细胞生物学、肿瘤学、骨组织工程、炎症相关疾病等领域,是评估该蛋白功能、表达水平及药物干预效果的重要研究工具,可用于验证药物对该蛋白表达的调控作用及相关疾病发病机制研究。本试剂盒核心特征是特异性强、操作便捷、检测快速,可精准定量相关指标含量,广泛应用于科研实验室、生物制品研发机构,是科研领域核心的多功能蛋白聚糖相关检测工具。

检测原理

本试剂盒的核心检测原理,基于酶联免疫吸附法(ELISA)的双抗体夹心法,聚焦多功能蛋白聚糖及相关检测指标的抗原抗体特异性结合特性,结合该蛋白检测的精准需求设计,契合ELISA技术的核心原理与操作规范:试剂盒预先将多功能蛋白聚糖特异性捕获抗体包被于酶标板上,加入待检测样本(细胞培养上清、细胞裂解液、组织匀浆等)后,样本中的多功能蛋白聚糖会与酶标板上的捕获抗体特异性结合,形成抗原-抗体复合物;洗涤去除未结合的杂蛋白、细胞碎片、无关糖蛋白及其他杂质后,加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体,与复合物特异性结合,形成“捕获抗体-多功能蛋白聚糖-酶标检测抗体"的三明治结构;再加入底物液(TMB),HRP催化底物发生显色反应,显色强度与样本中多功能蛋白聚糖的含量呈正相关,通过酶标仪在450nm主波长(参比波长630nm)下测定吸光度(OD值),对照标准曲线即可计算出样本中该蛋白的具体含量。检测流程规范:样本采集后需及时处理(细胞培养上清离心分离、细胞裂解液制备、组织匀浆研磨离心),按照试剂盒说明书稀释样本;酶标板平衡至室温后,依次加入标准品、样本及空白对照,37℃孵育30分钟;洗涤5次后加入酶标二抗,37℃孵育20分钟;再次洗涤5次后加入底物液,37℃避光孵育15分钟;加入终止液终止反应,10分钟内用酶标仪测定OD值,计算检测结果,全程约2.5小时,确保检测的可重复性与准确性。

产品特点

本产品针对多功能蛋白聚糖检测需求优化制备,核心特点如下:

1.  特异性优异:采用针对多功能蛋白聚糖的高特异性单克隆抗体,可特异性结合样本中的目标蛋白,不与其他无关糖蛋白、杂蛋白发生交叉反应,检测特异性>99%,确保检测结果精准,有效规避相关检测中的干扰因素,同时可有效区分该蛋白的真实表达水平与假阳性信号,适配糖蛋白检测的特异性需求;

2.  质控严格:每批次试剂盒均通过灵敏度、重复性、特异性及稳定性检测,附完整QC报告,确保批内变异系数(CV)<8%、批间变异系数(CV)<10%,检测灵敏度可达0.08ng/mL,符合科研标准,可精准监测样本中多功能蛋白聚糖的微量表达变化,助力该蛋白功能研究及药物干预效果评估,保障检测数据的可靠性;

3.  操作便捷:试剂盒含全套预配试剂(包被酶标板、标准品、酶标二抗、底物液、终止液、浓缩洗涤液等),无需额外配制核心试剂,步骤简化,全程可在2.5小时内完成,适配常规细胞生物学实验室操作,新手易上手,节省科研时间成本;

4.  样本兼容广:可适配细胞培养上清、细胞裂解液、组织匀浆、血清等核心样本类型,样本用量少(仅需50μL/孔),无需复杂预处理,仅需简单离心、稀释即可检测,适配细胞功能研究、组织损伤检测、肿瘤相关实验等多场景样本需求,覆盖该蛋白相关研究的主要样本类型;

5.  适配场景广:可用于多功能蛋白聚糖表达水平监测、细胞粘附与信号转导相关研究、组织修复机制研究、肿瘤侵袭转移相关检测、骨组织矿化异常研究及抗炎、抗肿瘤药物筛选,适配细胞生物学、肿瘤学、骨组织工程、炎症相关疾病等多领域科研需求,贴合该蛋白的核心生物学功能应用场景。

适用样本类型

本试剂盒适配多功能蛋白聚糖相关的体外科研检测,适用样本类型明确及处理要求如下:细胞培养上清样本(对数期细胞上清,12000rpm离心5分钟,去除细胞碎片,适用于分泌型多功能蛋白聚糖及相关因子检测);细胞裂解液样本(无菌收集细胞,用RIPA裂解液(含蛋白酶抑制剂)裂解,离心取上清,适用于细胞内多功能蛋白聚糖及信号通路分子检测);血清样本(静脉采血,室温静置后离心,避免溶血,4℃短期保存,适用于体内该蛋白表达水平及疾病相关检测);组织匀浆样本(取新鲜组织,研磨后用PBS匀浆,离心取上清,适用于组织中该蛋白的表达分析)。推荐检测体系:使用试剂盒配套酶标板,酶标仪需具备450nm/630nm双波长功能;样本稀释比例为培养上清1:5、细胞裂解液1:10、组织匀浆1:8(可根据实际浓度调整),标准品浓度梯度为0、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6ng/mL,参考区间以说明书为准,标准曲线采用优化后的4参数逻辑(4PL)模型拟合,提升定量准确性。(具体样本处理方法请参考产品说明书,相关细胞培养需遵循常规贴壁或悬浮细胞培养规范,推荐使用含10%胎牛血清及双抗的适宜培养基,培养条件为37℃、5%CO₂,定期观察细胞形态、增殖状态及多功能蛋白聚糖表达相关表型;冻存液建议为95%培养液+5%DMSO,液氮保存,低代次细胞可更好维持该蛋白的正常表达水平)

储存与注意事项

1.  试剂盒需全程2-8℃避光冷藏储存,严禁-20℃冷冻或常温放置,避免温度波动导致试剂降解、抗体活性丧失,尤其注意保护酶标抗体的催化活性与抗原抗体的特异性结合能力;

2.  标准品、酶标二抗等试剂开封后,密封冷藏保存,1个月内用完,多功能蛋白聚糖标准品避免反复冻融,防止其糖蛋白结构破坏、活性丧失,底物液需避光保存,避免提前显色影响检测结果;

3.  样本采集后及时处理,相关细胞培养上清、细胞裂解液冷藏24小时内完成检测,血清、组织匀浆冷藏或-20℃短期保存,48小时内完成检测,避免样本变质、目标蛋白降解,细胞样本需新鲜采集,避免细胞活力下降、蛋白表达异常影响检测结果,确保样本中该蛋白的完整性与活性;

4.  操作时严格遵循无菌规范,佩戴防护用品,避免试剂、样本接触皮肤黏膜;检测过程中控制孵育温度与时间,洗涤充分,避免未结合试剂残留导致结果偏差,稳健的洗涤步骤是降低背景信号、提升检测准确性的关键;

5.  底物液具有潜在刺激性,终止液为酸性溶液,操作时需谨慎,避免接触衣物与皮肤,检测完成后按生物安全规范处理废弃试剂与酶标板;

6.  相关样本需无菌采集与处理,细胞裂解液需充分裂解细胞,离心去除细胞碎片及杂质后再进行检测,避免杂质干扰检测结果,尤其注意去除样本中无关糖蛋白的干扰;培养上清需在细胞对数期采集,避免细胞凋亡释放的蛋白酶导致目标蛋白降解,同时避免培养体系中血清浓度过高影响检测准确性,药物干预实验中需设置空白对照与阴性对照,排除药物本身对显色反应的干扰,确保检测结果的可靠性。

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