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更新时间:2026-03-18
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染料特性:考马斯亮蓝G-250在酸性溶液中处于游离状态时呈棕红色,最da吸收波长为465nm,其分子可通过静电作用和疏水作用与蛋白质结合[6];
显色反应:当考马斯亮蓝G-250与样本中的蛋白质结合后,会形成稳定的染料-蛋白复合物,其最da吸收波长红移至595nm,溶液颜色从棕红色转变为蓝色[5];
定量关联:在一定的蛋白质浓度范围内,染料-蛋白复合物的显色强度与样本中总蛋白的含量呈正相关,检测波长建议为595nm(或560-610nm之间的其他波长)[3];
结果判定:通过酶标仪或分光光度计测定595nm处的吸光度(OD值),结合BSA标准品绘制的标准曲线,可定量计算出样本中总蛋白的具体浓度[3]。
品牌可靠:Amresco原装试剂,质量稳定,批次间差异小,检测结果重复性优良,契合科研实验对试剂纯度及稳定性的要求[1];
灵敏度高:优化染色反应体系,可检测到样本中微量蛋白,能精准捕捉低浓度蛋白的细微含量变化,满足科研实验对微量蛋白定量的需求[5];
操作便捷:试剂盒组分齐全(含5×G250染色液、PBS稀释液、BSA标准品等),无需额外配制核心试剂,实验步骤清晰,反应快速(室温孵育3-5分钟即可显色),可快速完成批量检测,适合常规实验室操作[3];
适用性强:适用于血清、血浆、细胞培养上清液、组织匀浆、蛋白提取液等多种样本类型,受大部分缓冲液成分干扰小,巯基乙醇、二硫苏糖醇等还原剂对检测影响较小[3];
易判读:显色反应稳定,蓝色复合物颜色清晰,吸光度测定便捷,可通过酶标仪或分光光度计两种方式检测,适配不同实验室设备[3]。
试剂盒未开封时:置于2-8℃避光干燥环境中保存,保存期限为9个月(自生产批次日期起);避免阳光直射、高温潮湿环境,严禁冷冻保存,防止染色液失效[1][2];
试剂盒开封后:5×G250染色液、PBS稀释液密封后置于2-8℃冷藏保存,可保存1个月,需加入干燥剂防止受潮;稀释后的1×G250染色液可在4℃保存一周,需避光存放[3];
BSA标准品:未溶解的标准品按未开封试剂盒条件保存;溶解后置于-20℃分装保存,避免反复冻融,建议1个月内使用完毕,使用时梯度解冻[3][4]。
本产品用于科研使用,不建议用于人体实验、临床诊断、治疗及相关应用,违规使用后果自负[1];
实验操作需在洁净实验台面进行,严格执行无菌操作规范,避免试剂污染、交叉污染;操作前需仔细阅读完整说明书,严格按照实验步骤及孵育时间、温度要求操作,移液需准确规范,减少操作误差[5];
试剂使用前需平衡至室温(约25℃),避免温度骤变影响显色效果;5×G250染色液使用前需轻轻颠倒3-5次混匀,避免剧烈震荡,防止染料聚集体影响检测[3][4];
显色反应受时间与温度影响较大,需保证样品与标准品的测定在同一条件下进行,显色完成后建议在1小时内完成吸光度检测,每组样品建议设置3个技术重复[5];
考马斯亮蓝G-250染色能力ji强,需注意比色杯和实验器具的清洗,可将比色杯在0.1mol/L HCl中浸泡数小时后冲洗干净,避免染料残留影响检测结果[1];
使用前需仔细核对试剂盒品牌、货号(140430)、批次及有效期,若发现试剂出现浑浊、沉淀、变色等异常,立即停止使用,并联系供应商处理;
实验过程中产生的废液、废弃试剂及耗材,需按实验室生物安全规范进行规范处理后,再进行废弃处理,避免环境污染;
样本需新鲜采集、规范处理,若样品蛋白浓度超出检测线性范围,需先jin行梯度稀释,使吸光度落在有效区间内再进行测定;待测蛋白中若碱性氨基酸(组an酸、精an酸、赖氨酸)含量异常,可能影响定量准确性[5]。
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