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活化T细胞核因子ELISA试剂盒
产品简介:

活化T细胞核因子ELISA试剂盒用于检测NFAT蛋白与DNA结合活性。采用DNA结合ELISA法,比EMSA灵敏百倍。用于T细胞活化、免疫调节及钙信号通路研究,仅供科研使用。

产品型号:

更新时间:2026-03-09

厂商性质:生产厂家

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产品介绍

活化T细胞核因子ELISA试剂盒

活化T细胞核因子ELISA试剂盒(Nuclear Factor of Activated T-cells ELISA Kit, NFAT ELISA Kit),是基于酶联免疫吸附法(ELISA)原理研发的科研专用检测试剂盒,可特异性检测相关样本中活化T细胞核因子(NFAT)的含量,也可用于该因子的表达水平监测、免疫调控机制研究及药物干预效果评估,经多维度验证,无交叉反应,结果稳定可靠,无试剂降解、杂菌污染等问题。该因子是一类重要的转录因子家族,核心功能是调控T细胞、B细胞等免疫细胞的活化、增殖与分化,参与免疫应答、炎症反应及免疫耐受的调控,其表达异常与自身免疫性疾病、肿瘤、感染性疾病及免疫缺陷相关,广泛应用于免疫学、细胞生物学、肿瘤学、感染病学等领域,是评估免疫功能、疾病发病机制及药物干预效果的重要研究工具,可用于验证药物对该因子表达的调控作用及免疫相关疾病机制研究。本试剂盒核心特征是特异性强、操作便捷、定量精准,是科研领域核心的该因子相关检测工具。

检测原理

本试剂盒的核心检测原理,基于酶联免疫吸附法(ELISA)的双抗体夹心法,聚焦活化T细胞核因子的抗原抗体特异性结合特性,结合该因子检测的精准需求设计,契合ELISA技术的核心原理与操作规范:试剂盒预先将活化T细胞核因子特异性捕获抗体包被于酶标板上,加入待检测样本(细胞裂解液、组织匀浆、血清、血浆等)后,样本中的该因子会与酶标板上的捕获抗体特异性结合,形成抗原-抗体复合物;洗涤去除未结合的杂蛋白、细胞碎片及无关因子后,加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体,与复合物特异性结合,形成“捕获抗体-活化T细胞核因子-酶标检测抗体"的三明治结构;再加入底物液(TMB),HRP催化底物发生显色反应,显色强度与样本中该因子的含量呈正相关,通过酶标仪在450nm主波长(参比波长630nm)下测定吸光度(OD值),对照标准曲线即可计算出样本中该因子的具体含量。检测流程规范:样本采集后需及时处理(细胞裂解液制备、组织匀浆研磨离心、血清/血浆无菌分离),按照试剂盒说明书稀释样本;酶标板平衡至室温后,依次加入标准品、样本及空白对照,37℃孵育30分钟;洗涤5次后加入酶标检测抗体,37℃孵育20分钟;再次洗涤5次后加入底物液,37℃避光孵育15分钟;加入终止液终止反应,10分钟内用酶标仪测定OD值,计算检测结果,全程约2.5小时,确保检测的可重复性与准确性。

产品特点

本产品针对活化T细胞核因子检测需求优化制备,核心特点如下:

1.  特异性优异:采用针对该因子的高特异性单克隆抗体,可特异性识别活化T细胞核因子,不与其他转录因子、免疫相关蛋白及杂蛋白发生交叉反应,检测特异性>99%,确保检测结果精准,有效规避相关检测中的干扰因素,同时可有效区分该因子的真实表达水平与假阳性信号,适配免疫相关样本检测的特异性需求;

2.  质控严格:每批次试剂盒均通过灵敏度、重复性、特异性及稳定性检测,附完整QC报告,确保批内变异系数(CV)<8%、批间变异系数(CV)<10%,检测灵敏度可达0.05ng/mL,符合科研标准,可精准监测样本中该因子的微量表达变化,助力该因子相关研究及药物干预效果评估,保障检测数据的可靠性;

3.  操作便捷:试剂盒含全套预配试剂(包被酶标板、标准品、酶标检测抗体、底物液、终止液、浓缩洗涤液等),无需额外配制核心试剂,步骤简化,全程可在2.5小时内完成,适配常规细胞生物学、免疫学实验室操作,新手易上手,节省科研时间成本;

4.  样本兼容广:可适配T细胞/B细胞裂解液、免疫相关组织匀浆、血清、血浆等核心样本类型,样本用量少(仅需50μL/孔),无需复杂预处理,仅需简单离心、稀释即可检测,适配免疫细胞功能研究、免疫相关疾病实验等多场景样本需求,覆盖该因子相关研究的主要样本类型;

5.  适配场景广:可用于该因子表达水平监测、免疫细胞活化机制研究、免疫相关疾病发病机制探索、免疫调节药物筛选及疗效评估,适配免疫学、细胞生物学、肿瘤学、感染病学等多领域科研需求,贴合该因子的核心生物学功能及临床科研应用场景。

适用样本类型

本试剂盒适配活化T细胞核因子相关的体外科研检测,适用样本类型明确及处理要求如下:细胞裂解液样本(无菌收集T细胞、B细胞等免疫细胞,用含蛋白酶抑制剂的RIPA裂解液裂解,12000rpm离心5分钟取上清,适用于细胞内该因子表达水平检测);组织匀浆样本(取新鲜免疫相关组织,研磨后用PBS匀浆,12000rpm离心10分钟取上清,适用于组织中该因子分布与表达分析);血清/血浆样本(静脉采血,血浆需用抗凝剂,室温静置后离心,避免溶血,4℃短期保存,适用于体内该因子含量及免疫相关疾病关联检测)。推荐检测体系:使用试剂盒配套酶标板,酶标仪需具备450nm/630nm双波长功能;样本稀释比例为细胞裂解液1:10、组织匀浆1:8、血清/血浆1:50(可根据实际浓度调整),标准品浓度梯度为0、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6ng/mL,参考区间以说明书为准,标准曲线采用优化后的4参数逻辑(4PL)模型拟合,提升定量准确性。(具体样本处理方法请参考产品说明书)

储存与注意事项

1.  试剂盒需全程2-8℃避光冷藏储存,严禁-20℃冷冻或常温放置,避免温度波动导致试剂降解、抗体活性丧失,尤其注意保护酶标检测抗体的催化活性与抗原抗体的特异性结合能力,防止影响活化T细胞核因子的检测准确性;

2.  标准品、酶标检测抗体等试剂开封后,密封冷藏保存,1个月内用完,该因子标准品避免反复冻融,防止其蛋白结构破坏、活性丧失,底物液需避光保存,避免提前显色影响检测结果;

3.  样本采集后及时处理,相关细胞裂解液、组织匀浆冷藏24小时内完成检测,血清、血浆冷藏或-20℃短期保存,48小时内完成检测,避免样本变质、目标因子降解,细胞样本需新鲜采集,避免细胞活力下降、因子表达异常影响检测结果,确保样本中该因子的完整性与活性;

4.  操作时严格遵循无菌规范,佩戴防护用品,避免试剂、样本接触皮肤黏膜;检测过程中控制孵育温度与时间,洗涤充分,避免未结合试剂残留导致结果偏差,稳健的洗涤步骤是降低背景信号、提升检测准确性的关键;

5.  底物液具有潜在刺激性,终止液为酸性溶液,操作时需谨慎,避免接触衣物与皮肤,检测完成后按生物安全规范处理废弃试剂与酶标板;

6.  相关样本需无菌采集与处理,细胞裂解液需充分裂解细胞,离心去除细胞碎片及杂质后再进行检测,避免杂质干扰检测结果,尤其注意去除样本中无关免疫相关蛋白的干扰;培养上清需在细胞对数期或活化诱导后采集,避免细胞凋亡释放的蛋白酶导致目标因子降解,同时避免培养体系中血清浓度过高影响检测准确性,药物干预实验中需设置空白对照与阴性对照,排除药物本身对显色反应的干扰,检测免疫相关疾病样本时,建议同步设置健康对照,便于实验数据对比分析,确保检测结果的可靠性。

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